為了明確特定巨噬細胞亞群的具體貢獻，研究者利用荷蘭Liposoma氯膦酸鹽脂質(zhì)體（CLL）處理后SIGN-R1?巨噬細胞恢復(fù)速度較慢的特點，研究了一個時間窗口——在此窗口期內(nèi)SIGN-R1?MARCO?細胞缺失，但SIGN-R1?MARCO?細胞和CD169?細胞均已恢復(fù)（7）。在CLL給藥后3周，小鼠過繼轉(zhuǎn)移MD4 B細胞和OT-II T細胞并按上述方案進行免疫。對照組動物接受磷酸鹽緩沖液（PBS）包被的脂質(zhì)體（PBS-L）處理，該處理對生發(fā)中心B細胞反應(yīng)無顯著影響（圖2C）。免疫熒光（IF）分析證實，在CLL處理的小鼠中SIGN-R1?巨噬細胞被選擇性清除，但CD169?和MARCO?細胞未被清除（圖2A）。邊緣區(qū)B細胞的頻率也與對照組處理動物相似，證實其已恢復(fù)（圖2B）。選擇性清除SIGN-R1?巨噬細胞足以損害生發(fā)中心反應(yīng)并降低生發(fā)中心B細胞頻率，這與在DT處理的CD169-DTR動物中觀察到的缺陷相似（圖2C）。

SIGN-R1?巨噬細胞的耗竭損害生發(fā)中心B細胞反應(yīng)。(A–E) 在過繼轉(zhuǎn)移OT-II T細胞和CD45.1? MD4 B細胞之前3周，受體小鼠經(jīng)靜脈注射氯膦酸鹽脂質(zhì)體（CLL）或PBS脂質(zhì)體（PBS-L），隨后進行HEL-OVA免疫。8天后分析脾臟。(A) 經(jīng)免疫的PBS-L處理組和CLL處理組小鼠脾臟切片的免疫熒光分析。白色方框標(biāo)示右側(cè)所示的高倍放大視圖。(B) 邊緣區(qū)B細胞的頻率。(C) HEL特異性生發(fā)中心B細胞的頻率。A–C中的數(shù)據(jù)代表至少五次獨立實驗中的一次。“未處理"組為未接受CLL或PBS-L的免疫小鼠。(D) 小鼠經(jīng)CLL或PBS-L處理，3周后以Ribi佐劑中的PE進行腹腔免疫。（左）用于確定PE?生發(fā)中心B細胞頻率的門控策略。（右）免疫后10天B細胞區(qū)室中PE特異性生發(fā)中心B細胞的頻率。數(shù)據(jù)代表三次獨立實驗中的一次。(E) 在流感病毒鼻內(nèi)感染前3周經(jīng)PBS-L或CLL處理的小鼠，其脾臟（左）和縱隔淋巴結(jié)（右）中生發(fā)中心B細胞的頻率。生發(fā)中心B細胞在感染后10天鑒定為B220?IgD^lowFAS?GL7?活細胞。數(shù)據(jù)代表兩次獨立實驗中的一次。(F) SIGN-R1-Cre/DTR?/?dTomato?/?小鼠脾臟切片的免疫熒光分析。(G) 經(jīng)DT處理或未處理的SIGN-R1-Cre/DTR?/?小鼠的脾臟。(H和I) 經(jīng)PE免疫后7天，DT處理或未處理的SIGN-R1-Cre/DTR?/?小鼠脾臟中生發(fā)中心B細胞反應(yīng)。(H) 按所示染色的免疫熒光分析。(I) PE特異性生發(fā)中心B細胞的門控策略（左）和頻率（右）。數(shù)據(jù)來自所進行的三次實驗中的一次代表性實驗。A和F–H中分析的切片來自每次實驗每組至少三只小鼠。

脾臟邊緣區(qū)巨噬細胞MZM的Marker：SIGN-R1 (CD209b)+，MARCO+

脾臟邊緣區(qū)噬金屬性巨噬細胞MMM的Marker：CD169 (Siglec-1)+，MOMA-1抗體來檢測CD169的表達。

MOMA-1本身并不是一個分子，而是一種單克隆抗體的名字，用于識別和標(biāo)記小鼠體內(nèi)的特定巨噬細胞。它識別并結(jié)合的靶標(biāo)分子是 CD169（也叫唾液酸黏附素或 Siglec-1）。

● 名稱由來：MOMA 是 "Monocytes and Macrophages"（單核細胞和巨噬細胞）的縮寫。它是由研究者 Kraal 和 Janse 在1986年報道的一種抗體。

● 靶標(biāo)分子：MOMA-1抗體所識別的抗原，在很長一段時間內(nèi)都是未知的。直到2006年，研究才證實它的靶標(biāo)就是CD169（Sialoadhesin）。

● 應(yīng)用場景：在免疫學(xué)研究中，MOMA-1是識別脾臟中邊緣區(qū)嗜金屬巨噬細胞（MMMs） 的經(jīng)典工具。它也常被用于標(biāo)記淋巴結(jié)、腸道固有層等其他組織中的特定巨噬細胞亞群。

論文信息：

論文題目：Marginal zone SIGN-R1+ macrophages are essential for the maturation of germinal center B cells in the spleen

期刊名稱：PNAS

時間期卷：117 (22) 12295-12305

DOI: 10.1073/pnas.1921673117

產(chǎn)品信息：

貨號：CP-010-010

規(guī)格：10ml+10ml

品牌：Liposoma

產(chǎn)地：荷蘭

名稱：Clodronate Liposomes&Control Liposomes

辦事處：靶點科技