急性炎癥是一種保護性反應，旨在殺滅入侵的病原體，通常是自限性的，并最終導向愈合。然而，免疫細胞的失控激活以及急性炎癥反應無法自限，將導致慢性炎癥，進而引起組織損傷。在組織損傷或感染后，單核細胞從循環中被募集，并分化為M1型巨噬細胞，后者通過釋放炎性細胞因子、活性氧、蛋白酶和抗菌肽來促進炎癥反應。隨后，巨噬細胞獲得強效的抗炎和促再生活性，廣義上稱為M2型巨噬細胞。除了拮抗M1型反應外，M1向M2表型的轉換在促進組織再生和恢復穩態方面也至關重要。M1巨噬細胞主導的異常炎癥是多種慢性炎癥性疾?。ò▌用}粥樣硬化、炎癥性腸病、哮喘、類風濕性關節炎、骨關節炎、多發性硬化癥和慢性靜脈性腿部潰瘍）的發病機制之一。因此，開發能夠減輕急性炎癥并促進M2型極化的治療藥物具有重大意義。
巨噬細胞極化在損傷后骨骼肌再生過程中起著核心調控作用。衛星細胞——肌肉中的成體干細胞——被激活后增殖、遷移至損傷部位、融合并分化，形成新的肌纖維。巨噬細胞直接調控衛星細胞的活化和成熟，對肌肉再生至關重要。在人肌肉損傷后，M1型巨噬細胞在體外和體內均可促進衛星細胞及肌源性前體細胞的增殖，而M2型巨噬細胞則促進其分化。巨噬細胞極化失衡，特別是向M1表型偏移，已被證實會抑制骨骼肌修復。向M2表型的轉化對于最終獲得功能性肌肉至關重要。
本研究的核心假說是：IL-4偶聯的金納米顆粒（AuNPs）能夠引導巨噬細胞向M2a型極化，從而增強缺血性損傷后功能性骨骼肌的再生能力。IL-4是一種抗炎細胞因子，可誘導M1型巨噬細胞向M2a狀態極化。外源性IL-4足以通過自我更新驅動M2型巨噬細胞的積累，這表明遞送IL-4可在無需進一步招募具有破壞性的M1型巨噬細胞的情況下，誘導治療性M2型巨噬細胞的擴增。IL-4已在多種炎癥性疾病模型（包括自身免疫性脫髓鞘疾病、關節炎和慢性皮膚炎癥）中被廣泛探索作為潛在治療藥物。然而，由于其在體內半衰期短，其應用需要反復輸注，由此產生的高劑量需求和系統性副作用限制了IL-4治療的應用。在本研究中，我們利用納米顆粒（NPs） 進行IL-4遞送，因為與一次性注射給藥相比，納米顆粒能夠在靶組織內實現廣泛分布并延長保留時間。我們特別選用金納米顆粒，是因為它們可以在臨床相關尺寸范圍內合成單分散粒徑，可注射使用，并且在人體中表現出極低的毒性或免疫原性。金的制劑已獲得美國食品藥品監督管理局（FDA）批準用于治療關節炎——一種慢性炎癥性疾病。
小鼠造模：
選用雌性C57BL/6J小鼠（6–8周齡），通過左側單側股動脈及股靜脈結扎術誘導后肢缺血模型。
氯膦酸鹽脂質體ClodronateLiposomes清除骨骼肌肌肉巨噬細胞清除方案：
通過結扎股動脈/靜脈，對C57BL6/J小鼠的左側脛骨前?。═A）施加缺血性損傷。為了耗竭單核細胞/巨噬細胞，從手術前2天開始，對小鼠給予荷蘭Liposoma氯膦酸鹽（clodronate）或作為對照的PBS脂質體（Liposoma）處理。
給藥時間線：
巨噬細胞耗竭實驗方案
氯膦酸鹽脂質體（Clodronate liposomes）及PBS脂質體均購自Liposoma公司。具體給藥方案如下：
● 靜脈注射（眼眶后注射）：于手術前2天給予70 μL脂質體進行眼眶后靜脈注射；此后，分別于術后第1天及第5天再次給予相同劑量（70 μL）的注射（具體流程見圖S1A）。
● 局部肌肉注射（脛骨前肌內注射）：于手術前1天，向缺血側脛骨前?。═A）肌內注射10 μL脂質體；此后，分別于術后第2天及第7天再次進行同樣劑量（10 μL）的局部注射。
論文信息：
論文題目：Functional muscle recovery with nanoparticle-directed M2 macrophage polarization in mice
期刊名稱：PNAS
時間期卷：115 (42) 10648-10653
DOI: 10.1073/pnas.1806908115
產品信息：
貨號：CP-010-010
規格：10ml+10ml
品牌：Liposoma
產地：荷蘭
名稱：Clodronate Liposomes&Control Liposomes
辦事處：靶點科技
Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質體清除肌肉巨噬細胞。荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑ClodronateLiposomes見刊于PNAS：通過納米顆粒引導M2型巨噬細胞極化實現小鼠功能性肌肉恢復。
Liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes氯膦酸二鈉脂質體清除巨噬細胞的材料和方法：
In vivo macrophage depletion
Macrophage Depletion. Clodronate and PBS liposomes were purchased from Liposoma (SKU: LIP-01). Liposomes (70uL) were administered retro-orbitally 2 days before surgery, and again on days 1 and 5 after surgery (Fig. S1A); 10uL were also administered intramuscularly into the ischemic TA 1 day before surgery, and again on days 2 and 7 after surgery.
巨噬細胞清除材料和方法文獻截圖：
